蛋白表現量錙銖必較 讓SuperSignal™ West Atto幫您明察秋毫

        西方墨點法中的所有實驗材料在市面上有許多的選擇,其中偵測試劑更是有不同等級與許多選擇,依照蛋白質表現量、樣本投入量或抗體效力,選擇與實驗條件相符之試劑等級,才可得到最佳實驗結果。

        隨著目前研究進展,更高解析度更高靈敏度的產品,是挖掘新發現所不可或缺,因此Thermo Fisher針對HRP substrates靈敏度進行優化,推出目前市面上最高敏的產品:SuperSignal™ West Atto Ultimate Sensitivity Substrate (以下簡稱Atto),讓我們隨著測試介紹,一起了解Atto吧!

將HeLa cell lysate序列稀釋,以西方墨點法偵測AKT蛋白表現量(一抗: MA5-14916、二抗: 32460),比較各廠偵測試劑靈敏度差異:

A. 此圖使用Atto與Bio-Rad、Millipore、PerkinElmer、GE等偵測試劑比較靈敏度,可見Atto在各濃度的訊號明顯強過其他試劑,且樣本量極低的條件下,也只有Atto可產生明顯訊號(紅框所示)。

B. 承上,針對圖A之紅框所圈訊號與背景值進行訊躁比分析 (Signal to noise ratio),如圖所示,在低樣本量組別中只有Atto能夠產生有效訊號

※SuperSignal™ West Atto敏感度最高,可偵測到更低量的蛋白質※

※SuperSignal™ West Atto在低濃度樣品可提供更有效的訊號(訊躁比佳)※

同樣將HeLa cell lysate序列稀釋,以西方墨點法偵測p23蛋白質表現量(一抗: MA3-414、二抗: 32430),使用Atto與Bio-Rad、Millipore之偵測試劑進行實驗,圖A可見Atto在低濃度蛋白樣品下靈敏度表現最佳。
圖A紅框中訊號進行數位化轉換為圖B,比較訊號強度與樣本投入量,可見在相同訊號強度時,Atto只需投入少量的樣本,而他牌的偵測試劑樣本消耗量約需Atto的16(見X軸)。

※SuperSignal™ West Atto樣本消耗量少,適用於珍貴檢體※

更多詳細資料請見:SuperSignal Chemiluminescent Substrates

 

經過上述的實驗,是否更了解SuperSignal™ West Atto的效能了呢?

    以下為您整理Atto的特性總結:

  • 訊號敏感度高: low-femtogram to high-attogram
  • 產品穩定性佳: working solution可存放48小時,4°C可保存一年
  • 支援常用濾膜: nitrocellulose與PVDF濾膜皆適用,不綁耗材
  • 訊號持久度好: 最高可持續6小時
  • 在高敏感度的支援下,可更節省抗體用量,稀釋比例建議如下:
    • 一抗: 1:1,000–1:5,000 稀釋 (0.2–1.0 µg/mL)
    • 二抗: 1:100,000–1:250,000 稀釋 (4–10 ng/mL)

更多產品細節請見: SuperSignal™ West Atto Ultimate Sensitivity Substrate

 

希望本期的產品新知,能協助各位科學家明察秋毫,不放過任何蛛絲馬跡,順利做出好Data,我們下期見!

發佈留言

這個網站採用 Akismet 服務減少垃圾留言。進一步瞭解 Akismet 如何處理網站訪客的留言資料